抑菌实验是评估抗菌药物体外活性的重要方法，主要分为定性测定和定量测定两大类，具体方法如下：
一、定性测定方法
- 纸片扩散法（Disk Diffusion Test）
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将含有定量抗菌药物的纸片贴于接种细菌的琼脂平板上，药物通过扩散形成抑菌圈。
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抑菌圈直径反映抗菌效力，与最低抑菌浓度（MIC）呈负相关。
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优点：操作简便、结果可靠，但需多次稀释确定MIC，耗时较长。
- K-B法（Kirby-Bauer Method）
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WHO推荐的标准化方法，通过测量抑菌圈直径与药物浓度的标准曲线对比，判断细菌敏感性。
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需使用标准菌株和M-H琼脂平板，结果需结合质控标准判断。
二、定量测定方法
- 微量稀释法（Microdilution Method）
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在96孔板中依次稀释待测菌液和抗菌药物，观察每个孔中细菌生长情况，确定最低抑菌浓度（MIC）。
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优点：可同时测试多种药物，灵敏度高，但需专业设备操作。
- 肉汤稀释法（ broth Dilution Method）
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在Mueller-Hinton肉汤中连续倍比稀释抗菌药物，与接种菌液混合后接种平板，通过抑菌圈直径计算MIC。
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优点：可快速获得MIC，但需大量样本和设备。
三、其他补充方法
- 孔板法（Well Plate Method）
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类似纸片扩散法，但使用微孔板，可高通量筛选抗菌物质。
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优势：自动化程度高，适合大规模筛选。
- 动态抑菌试验（Dynamic Inhibition Assay）
- 观察抗菌物质对细菌生长曲线的动态抑制作用，适用于研究药物代谢动力学。
四、注意事项
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质控与标准化 ：使用标准菌株、灭菌设备，并规范操作流程，确保结果可靠性。
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影响因素 ：培养基质量、药物浓度梯度、接种量等均可能影响结果，需控制变量。
通过以上方法，可系统评估抗菌药物的抗菌谱、敏感性和临床应用价值。
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