PstI酶切位点序列是CTGCAG，识别并切割DNA双链中该特定6碱基回文序列，产生3'端黏性末端。
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序列特征
PstI属于II型限制性内切酶，专一识别CTGCAG序列，切割位点在CAG↓CTG（箭头表示切割位置）。其回文结构使两条链的切割位置对称，形成互补的3'端单链突出（黏性末端），便于后续连接反应。 -
应用场景
- 克隆载体构建：利用PstI切割载体和目的基因，通过黏性末端互补配对完成重组。
- DNA指纹分析：与其他酶组合用于基因组多态性检测。
- 质粒图谱验证：通过酶切电泳确认重组质粒的正确性。
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注意事项
- 酶切条件：需匹配缓冲液（如NEBuffer 3.1）和37℃反应温度。
- 星号活性：高甘油浓度或长时间孵育可能导致非特异性切割，需控制反应时间。
总结：PstI的CTGCAG序列是分子生物学中高效工具，精准切割特性使其广泛应用于基因工程实验，操作时需注意优化反应体系以避免偏差。**
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