根据《道路旅客运输企业安全管理规范》及最新法规要求，客运大巴夜间强制休息时间如下：

核心结论

客运大巴在 凌晨2:00至5:00 必须强制停车休息，禁止在高速公路及普通道路行驶，以确保驾驶员安全。

具体规定

1. 强制休息时段

   • 2:00-5:00 ：长途客运车辆（含大巴）必须停车休息或采用接驳运输，禁止在高速公路及普通道路行驶。

   • 特殊线路例外 ：机场、高铁快线及单程100公里以内的短途客运车辆，若安全可行，可不受此限制。

2. 休息与换班要求

   • 驾驶员连续驾驶时间不得超过4小时，夜间不得超过2小时，每次休息不少于20分钟。

   • 高速公路行驶时，需配备2名以上合格驾驶员，夜间2:00-5:00换班时，休息驾驶员需强制卧床休息≥6小时，且交接班间隔≥8小时。

3. 法律依据

   • 依据《道路旅客运输企业安全管理规范》第38条及《国务院关于加强道路交通安全工作的意见》等法规，明确夜间禁行时段及安全保障措施。

注意事项

• 违反规定可能面临处罚，同时增加事故风险，企业需严格执行。

• 乘客应配合驾驶员管理，避免夜间走动，确保财物安全。