紫外分析方法的建立主要包括以下核心步骤和要点，结合权威信息整理如下：

一、方法建立基本程序

1. 线性关系验证

   通过标准曲线法确定吸收度与浓度关系。例如，以扑热息痛对照品为标准，配制不同浓度的标准溶液，在257nm波长下测定吸收度，计算线性方程（A=a+bC），验证线性范围（如0.32~1.92mg/ml）。

2. 回收率试验

   采用加标回收法评估方法准确性。将对照品加入样品中，按标准方法测定吸收度，计算回收率，确保结果可靠。

3. 精密度验证

   通过重复测定同一样品，计算变异系数（RSD），确保方法重复性良好。

二、仪器与试剂选择

• 仪器配置 ：使用紫外-可见分光光度计，光源为氢灯，单色器为石英棱镜，检测器为光电倍增管。

• 试剂要求 ：标准溶液需使用0.4%-0.5%NaOH调节pH，确保吸收度测量稳定。

三、波长范围与原理

• 适用范围 ：200-800nm（含紫外和可见光区），其中紫外区（200-400nm）和可见光区（400-800nm）常用于分析。

• 吸收机制 ：分子中价电子跃迁导致光吸收，不同物质在特定波长处有特征吸收峰。

四、注意事项

• 远紫外光（100-200nm）因空气吸收需真空环境，实际分析中较少使用。

• 样品需研磨细粉并溶解，确保浓度均匀。

通过以上步骤，可建立标准化的紫外分析方法，适用于药物、环境等领域的定量与定性分析。