不可以

根据国家及地方交通管理规定，大巴车在凌晨2:00至5:00期间禁止在高速公路上行驶，具体规定如下：

一、禁止通行政策

1. 时间限制

   凌晨2:00至5:00期间，所有营运性大客车（包括长途客运车辆）被禁止驶入高速公路。

2. 特殊例外情况

   • 线路固定且单程不足100公里的短途客运车辆 ：若运营线路固定且单程里程在100公里以内，在确保安全的前提下可不受限制。

   • 机场/高铁快线车辆 ：执行机场、高铁站点的短途驳载任务时，不受该时段限制。

二、相关安全规定

1. 驾驶员管理

   • 大巴车需遵守《道路旅客运输企业安全管理规范》，夜间连续驾驶时间不得超过2小时，每2小时必须停车休息20分钟。

   • 若已进入高速，需在服务区休息至5:00后继续行驶。

2. 速度限制

   • 服务区休息后重新上路时，车速不得超过100公里/小时（部分路段可能降至80公里/小时）。

三、违规后果

• 罚款与扣分 ：违反规定将面临高额罚款（如2000元）及12分及以上扣分。

• 法律责任 ：因疲劳驾驶引发事故，可能面临吊销驾照、罚款等法律制裁。

四、建议

• 提前规划 ：夜间出行应尽量避开高峰时段，若需夜间行驶，需选择其他路线或改用其他交通方式。

• 服务区休息 ：每行驶4小时必须停车休息，避免疲劳驾驶。

以上规定旨在保障道路交通安全，减少夜间交通事故风险。